当往某些溶液中加入一定量的酸和碱时,有阻碍溶液pH变化的作用,称为缓冲作用,这样的溶液叫做缓冲溶液。弱酸及其盐的混合溶液(如HAc与NaAc),弱碱及其盐的混合溶液(如NH3.H2O与NH4Cl)等都是缓冲溶液。由弱酸HA及其盐NaA所组成的缓冲溶液对酸的缓冲作用,是由于溶液中存在足够量的碱A-的缘故。当向这种溶液中加入一定量的强酸时,H离子基本上被A-离子消耗:所以溶液的pH值几乎不变;当加入一定量强碱时,溶液中存在的弱酸HA消耗OH-离子而阻碍pH的变化。长时间或过量使用PBS缓冲液可能会对人体产生耐受性,导致恶心、呕吐、腹泻等症状。海南DPBS缓冲液有哪些
2.配制方法:将Tris-HCl平衡苯酚与等体积的氯仿/异戊醇(24:1)混合均匀后,移入棕色玻璃瓶中4℃保存。10%(W/V)SDS组份浓度:10%(W/V)SDS配制量:100ml配制方法:1.称量10g高纯度的SDS置于100-200ml烧杯中,加入约80ml的去离子水,68℃加入溶解2.滴加浓盐酸调节pH值至3.将溶液定容至100ml后,室温保存。2NNaOH组份浓度:2NNaOH配制量:100ml配制方法:1.量取80ml去离子水置于100~200ml塑料烧杯中(NaOH溶解过程中大量放热,有可能使玻璃烧杯炸裂)。2.称取8gNaOH小心地逐渐加入到烧杯中,边加边搅拌。3.待NaOH完全溶解后,用去离子水将溶液体积定容至100ml。4.将溶液转移至塑料容器中后,室温保存。NHCl组份浓度:NHCl配制量:100ml配制方法:1.在ml的去离子水中加入ml的浓盐酸(N),均匀混合。2.室温保存。5MNaCl组份浓度:5MNaCl配制量:1L配制方法:1.称取gNaCl置于1L烧杯中,加入约800ml的去离子水后搅拌溶解。2.加去离子水将溶液定容至1L后,适量分成小份。3.高温高压**后,4℃保存。20%(W/V)Glucose组份浓度:20%(W/V)Glucose配制量:100ml配制方法:1.称取20gGlucose置于100~200ml烧杯中,加入约80ml的去离子水后,搅拌溶解。2.加去离子水将溶液定容至100ml。海南DPBS缓冲液有哪些PBS缓冲液的离子浓度与人体血液相似。
1:50~l:800)后,按行进行包被、洗涤。按列分别加入用稀释液1:100稀释的强阳性、弱阳性、阴性参考血清及稀释液(作空白对照),保温,洗涤。加工作浓度酶标抗体,洗涤,加底物显色,加酸终止反应后读取A值。选择强阳性参考血清A值;为0.8左右,阴性参考血清A值<0.1的包被抗原稀释度为工作浓度。?方阵(棋盘)法选择包被抗体和酶标抗体的工作浓度将抗体用包被液稀释为10mg/L、lmg/L、/L三个浓度按行包被,每一个浓度包被三行(每行3孔),分别在每个浓度包被的***、二、三行中分别加入强阳性抗原,弱阳性抗原和阴性对照,将酶标抗抗体用稀释液稀释为1:l000、l:5000、l:10000三个浓度,分别加入每个浓度包被的***、二、三列中。加底物显色,加酸终止反应,分别读取A值。以强阳性抗原液A值在,阴性参考A值<**适条件。据此选择包被抗体和酶标抗体的**佳工作浓度。?二、ELISA**适工作浓度的选择及标准化操作1**适工作浓度的选择?1.1间接法测抗体?????酶标抗体工作浓度的选择:①用IgG进行包被,洗涤。②将酶标IgG用稀释液作一系列稀释后分别加入已包被的孔中,保温、洗涤。③加酸终止反应后,读取吸光度(A)。读取A值在1.0时的酶标抗体稀释度,作为酶标抗体的工作浓度。
实验室使用缓冲液时的pH计或酸度计调校方法:1、在对缓冲液使用pH计进行校正时,需要调整仪器的斜率,并将电极上部的橡胶塞拨开,将小孔暴露在外。否则,在校正过程中会产生负压,导致溶液无法正常进行离子交换,从而使测量数据不准确。2、将电极从烧杯中取出,用滤纸将未干的水分吸干,然后将其放入装有混合磷酸盆的烧杯中,等待大约15分钟,然后进行仪器的调整,设定基准点。3、然后将电极放入装有KHC8H4O4或硼砂溶液的容器中,等待15分钟后,观察仪器显示的pH数值。4、校正完成后,将橡胶塞放回原位。如果暂时不使用pH计,一定要保护好它,将其放入保护套中,以延长其寿命。此外,需要注意的是pH计属于易碎品,需要轻拿轻放。
手持式缓冲液pH计的校准方法:在温度为25度的条件下,将测试电极插入pH值为6.86的混合磷酸盐标准缓冲液中,并缓慢转动电极。可以稍微调整校正电位器,直到显示器上的数值与标准缓冲溶液的pH值相同。如果将电极插入其他缓冲溶液中,如pH值为4.01的C8H5KO4或pH为9.18的硼砂标准缓冲溶液中,显示的数值与缓冲液的pH值允许有一定误差,但误差应在参考值范围内。 缓冲液(Buffer solution)通常是由弱酸及其共轭碱或弱碱及其共轭酸缓冲对所组成的溶液。
3.高温高压**后,4℃保存。SolutionI(质粒提取用)组份浓度:25mMTris-HCl(),10mMEDTA,50mMGlucose配制量:1L配制方法:1.量取下列溶液,置于1L烧杯中。2.高温高压**后,4℃保存。3.使用前每50ml的SolutionI中加入2ml的RNaseA(20mg/ml)。SolutionII(质粒提取用)组份浓度:200mMNaOH,1%(W/V)SDS配制量:500ml配制方法:1.量取下列溶液,置于500ml烧杯中10%SD50ml2NNaOH50ml2.加**水定容至500ml,充分混匀3.室温保存,此溶液保存时间比较好不要超过一个月注意:SDS易产生气泡,不要剧烈搅拌SolutionIII(质粒提取用)组份浓度:3MKOAc,5MCH3COOH配制量:500ml配制方法:1.称量下列试剂,置于500ml烧杯中。2.加入300ml去离子水后搅拌溶解。3.加去离子水将溶液定容至500ml。4.高温高压**后,4℃保存。MEDTA()组份浓度:MEDTA配制量:1L配制方法:1.称取gNa2EDTA·2H2O,置于1L烧杯中。2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌。3.用NaOH调节pH值至(约20gNaOH)。注意:pH值至,EDTA才能完全溶解。4.加去离子水将溶液定容至1L。5.适量分成小份后,高温高压**。6.室温保存。1MDTT组份浓度:1MDTT配制量:20ml配制方法:1.称取gDTT,加入到50ml塑料离心管内。2.加20ml的MNaOAc()。生化实验中加入缓冲液的目的和作用。湖南PBS缓冲液大概价格多少
在酶活性实验中,缓冲液的主要作用是维持实验环境的pH稳定。海南DPBS缓冲液有哪些
测定PBS液的PH值约为。磷酸盐缓冲液取磷酸二氢钠,与磷酸氢二钠。磷酸盐缓冲液()甲液:取磷酸,加水至1000ml,摇匀。乙液:取磷酸氢二钠,加水使溶解成1000ml。取上述甲液,摇匀,即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾100g,加水800ml,用盐酸调节pH至。磷酸盐缓冲液()取,即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾,即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾,用水稀释至100ml,即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钠、磷酸氢二钠,加水使溶解成400ml,即得。磷酸盐缓冲液(含胰酶)()取磷酸二氢钾;另取胰酶10g,加水适量使溶解,将两液混合后,加水稀释至1000ml,即得。磷酸盐缓冲液()取,加,用水稀释至1000ml,摇匀,即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾,加,用水稀释至100ml,即得。磷酸盐缓冲液()取,加新沸过的冷水稀释至200ml,摇匀,即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸氢二钠,调节pH值至,即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾,加,用水稀释至200ml,即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾,加水使溶解成1000ml,取50ml,加,再加水稀释至200ml,即得。磷酸盐缓冲液()甲液:取磷酸氢二钠,加水溶解,并稀释至500ml。乙液:取磷酸二氢钠,加水溶解,并稀释至100ml。取上述甲液,摇匀,即得。磷酸盐缓冲液。 海南DPBS缓冲液有哪些
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